طراحی و بررسی مقایسه ای روش‏های مولکولی تشخیص سریع مقاومت به داروهای تزریقی ضد سل در سویه‏های کلینیکی میکوباکتریوم توبرکلوزیس

مقدمه: در این تحقیق، برای تشخیص سریع مقاومت به کانامایسین، آمیکاسین، کاپرئومایسین، چند روش مولکولی طراحی و مقایسه شدند.   مواد و روش ‏‏ ها: از میان 120 سویه کلینیکی مایکوباکتریوم توبرکلوزیس، 70 سویه برای بررسی موتاسیون ‏ها ی احتمالی انتخاب شدند. در روش pcr-rflp ‏ از آنزیم ajii برای تشخیص سویه وحشی و از آنزیم bstfni برای شناسایی سویه موتانت استفاده شد. علاوه بر این، در طراحی روش آلل اسپسیفیک همزمان ( m as pcr ) از سه پرایمر اختصاصی برای تعیین حالت‏های وحشی و نیز موتان کدون‏های 1401 و 1402 استفاده شد. تعدادی از سویه‏ها تعیین توالی (سکوئنس) شدند.   نتایج: در روش pcr - rflp ‏از میان 70 سویه مورد بررسی، با آنزیم bstfni , 17 سویه موتان از میان 24 سویه مقاوم فنوتیپی و 44 سویه غیر موتان از 46 سویه، حساس تشخیص داده شدند. حساسیت این روش 83/70 و ویژگی آن 65/95 درصد بود. آنزیم ‏ ajii از میان 52 سویه مورد بررسی، ‏12 سویه موتان از میان 20 سویه مقاوم و 29 سویه غیر موتان را از میان 32 سویه حساس فنوتیپی تشخیص داد. حساسیت این روش 60 و ویژگی آن 62/90 درصد بوده است. در روش آلل اسپسیفیک 23 سویه بررسی شدند. این روش قادر به تشخیص 3 سویه موتان از میان 6 سویه مقاوم و 12 سویه غیرموتان از میان 17 سویه حساس فنوتیپی شد. حساسیت این رو ش 50 و ویژگی آن 58/70 درصد بوده است. نتایج تعیین ترادف اثبات کننده صحت نتایج روش‏های مولکولی استفاده شده، بود.   بحث و نتیجه ‏ گیری: روش pcr - rflp ‏ با آنزیم bstfni ، به عنوان یک روش سریع در تشخیص مقاومت مایکوباکتریوم توبرکلوزیس به داروهای تزریقی خط دوم درمان سل پیشنهاد می‏شود .